| 制品內(nèi)容 （250 U） |
| Fast Taq DNA聚合酶（5 U/μl） | 50 μl | | 2 × GT PCR Reaction Mix | 2000 μl | |
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| · 制品說明 |
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SinoBio Fast Genotyping PCR Kit超敏基因組PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒（快速型）專門為基因組及微量DNA PCR擴(kuò)增檢測(cè)設(shè)計(jì)優(yōu)化，可從少量基因組模板中高效擴(kuò)增出0.2kb～4kb的目的條帶，其靈敏度為普通PCR反應(yīng)的100～10,000倍。適用于基因組PCR擴(kuò)增、微量模板、復(fù)雜模板等的擴(kuò)增和大規(guī)?；驒z測(cè)。
針對(duì)普通Genotyping PCR循環(huán)數(shù)目多（40次循環(huán)），反應(yīng)時(shí)間較長(zhǎng)缺陷，超敏基因組PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒（快速型）采用SinoBio FastTaqDNA聚合酶，該酶是利用分子進(jìn)化技術(shù)在普通Taq酶基礎(chǔ)上改造、制備的新型FastTaq DNA聚合酶，其擴(kuò)增速度大幅提高，至少為普通Taq酶的4倍，因此大大縮短了基因組PCR擴(kuò)增檢測(cè)所需的時(shí)間。
本產(chǎn)品包括2X反應(yīng)緩沖體系和酶2個(gè)獨(dú)立的組分，其2X Reaction Mix包含了genotyping PCR所需的全部試劑、dNTP及PCR增強(qiáng)劑。本產(chǎn)品使用方便快捷，使用時(shí)只需在2X Reaction Mix加入引物、模板及酶并加入去離子水稀釋至1X即可進(jìn)行反應(yīng)。2X Reaction Mix提供不含染料/含染料（藍(lán)色）兩種形式供您選擇，經(jīng)測(cè)試，染料的加入不影響擴(kuò)增性能。2X Reaction Mix中預(yù)混藍(lán)色染料的，在配置反應(yīng)體系時(shí)，可很方便地檢測(cè)各組分混勻情況，在PCR反應(yīng)完成后可直接電泳，節(jié)省時(shí)間。 | | | |
| · 用 途 |
| 適用于從復(fù)雜背景中擴(kuò)增微量模板DNA。由于Genotyping PCR的突變率高于普通PCR反應(yīng)，故其產(chǎn)物不推薦用于需高保真的基因克隆。Genotyping PCR所用引物需精心設(shè)計(jì)，否則會(huì)擴(kuò)增出較多雜帶，（參見PCR引物設(shè)計(jì)的黃金法則）。 |
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| · 產(chǎn)品特點(diǎn) |
| 本產(chǎn)品不同批次之間誤差很小，特別適合大規(guī)?；驒z測(cè)和微量DNA的檢測(cè)。復(fù)雜模板（如含二級(jí)結(jié)構(gòu)，GC rich，和重復(fù)序列等）的擴(kuò)增：（如構(gòu)建基因圖譜、測(cè)序及分子遺傳學(xué)研究等）。PCR產(chǎn)物如需克隆，純化后可直接進(jìn)行T/A載體克隆。 |
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| · 質(zhì)量保證 |
| 使用推薦體系及PCR程序，可從100ng人基因組DNA背景中擴(kuò)增檢測(cè)出1fg LacZ質(zhì)粒模板的存在。 |
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| · 使用建議 |
| 經(jīng)測(cè)試按右側(cè)反應(yīng)體系及PCR程序可獲得理想的擴(kuò)增結(jié)果。推薦將此反應(yīng)體系及PCR程序作為條件優(yōu)化的初始反應(yīng)。 |
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| · 推薦體系及程序 |
| 超敏基因組PCR擴(kuò)增檢測(cè)反應(yīng)體系 | | 2X Reaction Mix | 10μl | | 上游引物 | 0.05μM（終濃度） | | 下游引物 | 0.05μM（終濃度） | | 模板DNA | 1～100ng基因組DNA | | FastTaq酶 | 0.25 | | ddH2O | 至20μl | | *反應(yīng)體系可成比例調(diào)整至50μl等體積 | | 超敏基因組PCR擴(kuò)增檢測(cè)PCR程序 | | 93℃ | 1分鐘30秒 | | 40次循環(huán) | 93℃，30秒 | | | 57℃，30秒 | | | （57℃適用于大多數(shù)反應(yīng)亦可在55～60℃間調(diào)整） | | | 65℃，按產(chǎn)物長(zhǎng)度15秒/1kb計(jì)算 | |
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